在做生化实验血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳中,为什么只出现了两条带
问题更新日期:2024-05-09 02:32:29
问题描述
在做生化实验血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳中,为什么只出现了两条带,麻烦给回复
- 精选答案
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在PCR扩增的时候,dntp的浓度是会影响特异性的。
(例如在做易错PCR时,一种方法就是改变dntp的浓度,具体原理好像是和分子动力学有关系)另外如果跑条带的时候出现彗星状尾巴,还有可能是样品被酶切了。。(跑RNA的时候尤其容易出现这种情况)针对问题:
1. 已经回答过啦,就不赘述了。
2. 是因为PCR次数太多后,引物的特异性结合率会下降,非特异产物就会变多。
3. 是因为高压电会损害琼脂糖凝胶的孔径大小,因为跑条带是为了良好的分开不同分子量的DNA(为了分开不同大小的DNA,使用琼脂糖的的浓度是不一样),电压一高,琼脂糖分子形成的孔径被破坏,自然跑的胶就不好看啦。而且电压过高,甚至会使琼脂糖凝胶融化,效果自然不会好。
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