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dna电泳染色剂有哪些
问题描述
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5种常用DNA染液Relea在许多选择中,这五个生物染料中是最常见的,首先是使用最广泛的溴化乙锭。
在进行此过程时,不仅要了解污渍之间的差异,而且要了解固有的健康风险,这一点很重要。溴化乙锭溴化乙锭可能是用于可视化DNA的最著名的染料。 它可以用于凝胶混合物,电泳缓冲液中,或在电泳后对凝胶染色。染料的分子附着在DNA链上,并在紫外光下发出荧光,向您确切显示条带在凝胶中的位置。 尽管有其优点,但不利之处在于溴化乙锭是一种潜在的致癌物,因此必须谨慎处理。SYBR GoldSYBR Gold染料可用于对双链或单链DNA染色或对RNA染色。 SYBR Gold作为溴化乙锭的首批替代品之一进入市场,并被认为更加敏感。一旦与核酸结合,该染料就会表现出1000倍的更大的UV荧光增强。 然后它会渗透到厚而高百分比的琼脂糖凝胶中,并可以用于甲醛凝胶中。由于未结合分子的荧光非常低,因此不需要脱色。 自SYBR Gold推出以来,持有许可证的分子探针还开发并销售了SYBR Safe和SYBR Green,它们是溴化乙锭的更安全替代品。SYBR GreenSYBR Green I和II染色剂(再次由Molecular Probes销售)针对不同目的进行了优化。 由于它们与DNA结合,因此仍被认为是潜在的诱变剂,因此,应谨慎处理。SYBR Green I对双链DNA敏感,而SYBR Green II最适合与单链DNA或RNA结合使用。 像流行的溴化乙锭染料一样,这些高度敏感的染料在紫外线下会发出荧光。推荐将SYBR Green I和II与“ 254 nm落射照明宝丽来667黑白胶片和SYBR Green凝胶染色照相滤光片”配合使用,以实现每100 pg RNA或单链DNA的检测带。SYBR SafeSYBR Safe被设计为是溴化乙锭和其他SYBR染料的更安全替代品。 它不被认为是有害废物,通常可以通过常规下水道系统(即下水道)进行处理,因为毒性测试表明没有急性毒性。测试还表明,对叙利亚仓鼠胚胎(SHE)细胞,人淋巴细胞,小鼠淋巴瘤细胞几乎没有遗传毒性,或者在AMES测试中指出。 该染色剂可与蓝光透射照明器一起使用,这对可见的DNA造成的损伤较小,并为以后的克隆提供了更高的效率。Eva GreenEva Green是一种绿色荧光染料,已发现其抑制聚合酶链反应(PCR)的程度低于其他染料。 这对于定量实时PCR等应用非常有用。如果要使用低熔点凝胶回收DNA,这也是一个不错的选择。 它在高温下非常稳定,单独具有很低的荧光,但是与DNA结合时却具有很高的荧光。 Eva Green还被证明具有极低的细胞毒性或致突变性。
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