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FlowJo流式数据分析基础——常见术语
FlowJo,由斯坦福大学Leonard Herzenberg实验室在90年代推出的流式数据分析软件,因其强大功能和易用性而备受科学家和实验室青睐,成为各类高影响力期刊中引用率极高的工具。当我们使用FlowJo进行数据分析时,一些术语至关重要。首先,了解参数图至关重要:
1.1 一维直方图 (Histogram): 单个细胞的单参数测量数据通过统计分布,以直方图呈现。横轴是荧光或散射光信号强度,线形或对数显示;纵坐标则表示细胞数量。
1.2 二维散点图 (Dot Plot): 两个参数的二维图,横纵坐标同样表示荧光或散射光强度,用于多参数数据的分析。
1.3 其他参数图:如密度图和等高线图。
接着是门(Gate)的使用,有多种形式:
2.1 门的定义:区域、标记和十字形等。门的组合包括and、or、not操作。
2.2 定义门的方法:通过转换标记成门、四边形转门等操作。
在数据统计方面,常用百分比和荧光强度(MFI):
(1)百分比表示细胞在样本中的占比。
(2)荧光强度(MFI)与细胞表面受体数量相关,如Median值对应164.74时,表示正相关。
对于数据可视化,FlowJo支持峰图和点图的叠加,以及模拟分析,如细胞增殖、细胞周期和剂量效应分析。
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