流动相怎么使用

流动相在液相色谱（HPLC）中扮演着至关重要的角色，它影响着分离效果和仪器的正常运行。以下是流动相使用的一些关键步骤和注意事项：

流动相的配制和使用

平衡色谱柱

使用至少20倍柱体积的流动相来充分平衡色谱柱。

确保流动相是色谱级别的溶剂，如果是水相缓冲液，应当天配制以保持新鲜。

过滤流动相

使用微孔滤膜过滤流动相，以消除其中的颗粒，防止对色谱系统和柱造成损害。

缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤。

脱气处理

流动相使用前需进行脱气处理，以避免气泡影响泵和检测器的工作。

流动相的选择

根据分析物的化学性质和固定相性质选择合适的水性或非水性流动相。

调节流动相的极性，以优化分离效果。

使用缓冲盐

使用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱，直至基线平稳。

使用与分析时相同含水比例的流动相进行冲洗，不含缓冲盐。

如果流动相中有缓冲盐，使用纯水进行“过渡”冲洗。

注意事项

避免使用盐酸盐等对钢质有腐蚀作用的盐类。

缓冲液应现配现用，避免细菌滋生和沉淀产生。

实验后不可直接用有机溶剂冲洗，可用水和甲醇的混合液。

流动相的pH值对分析物和固定相的电离状态有影响，需根据具体情况调整。

流动相的粘度要低，以降低柱压降，延长泵的使用寿命。

流动相沸点不宜过低，防止气泡产生。

遵循上述步骤和注意事项，可以确保液相色谱分析的顺利进行和结果的准确性。